本文目录一览试设计2个以上的克隆动物的试验方案并阐述过程2,怎样试验植物开花的时间与温度有关3,我在做准备试验想提前配制好酚酞指示剂这种东西容易变质么4,15类药品申请专利在证明其有效性时需不需要做到临床试验呢还是5,动物染色体的制备实……
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1,试设计2个以上的克隆动物的试验方案并阐述过程
你可以参考一下多利羊的产生过程啊,基本上就是这样。其实现在的克隆只是拟克隆,还是要涉及到性细胞的使用,如果是真正意义上的克隆 ,应该完全用体细胞来完成。
2,怎样试验植物开花的时间与温度有关
植物开花的时间与湿度、温度有关,与动物没有关系。所以这句话不对。一个在温棚里栽种,一个在室外栽种,在湿度,阳光,氧气等其他因素一致时,作出比较,
3,我在做准备试验想提前配制好酚酞指示剂这种东西容易变质么
酚酞(w为0.01)指示剂:溶解1g酚酞于90ml酒精与10ml水的混合液中。不容易变质,一般半年时间(不容易变质的试剂都要求只能用半年,药典规定的)内都可以用
4,15类药品申请专利在证明其有效性时需不需要做到临床试验呢还是
首先是你的配方有没有申请发明专利! 如果已经申请了 你和药厂谈好转让价格或者许可价格后! 签个转让协议或者许可合同 然后最好到知识产权局备案! 希望我回答能帮助到你1这需要根据具体情况来判断。有的是不需要的,比如抗菌性的药物,只需要体外培养(表面培养、试管培养)就可以。但是根据发明点,有的是需要人体实验和动物实验进行证明的。
5,动物染色体的制备实验中为什么要用不同浓度的柠檬酸钠
1)动物的选择,一般用小鼠,其繁殖能力强,易于饲养.我们常用的是它们的骨髓细胞和精巢,因其分裂指数较高,不用体外培养就可以得到分裂中期的细胞. 2)秋水仙素用量要注意,太多或处理时间过长,会导致染色体的过分凝缩或着丝点裂解,最终会引起染色体形态不正常,甚至被破坏或溶解。 3) 低渗处理很关键。低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关。低渗过度,细胞会破裂;低渗不足则染色体在一起,分散不开。 4) 离心速度或离心时间也能影响染色体标本的制备。离心速度过大或离心时间过长,则会引起细胞破裂;反之,离心速度过小或离心时间过短,则细胞沉降不下来,则会引起大量细胞的丢失。 5) 固定液要随用随配,固定彻底后再打散细胞团块,否则细胞容易破碎,染色体分散亦受到影响。 6) 载玻片要预冷.冷却不够,则会影响染色体的附着和铺展。 7) 用吸管吹散细胞时用力必须尽量轻柔,用力过大则会造成细胞破裂,而染色体也会弥散在溶液中,在随后的离心中将会丢失。 8) 滴片时的高度很重要,高度过低细胞不会破裂;过高则染色体过于分散甚至丢失,无法辨别出染色体的准确数量。每种生物细胞的承受能力不同,它配出来的柠檬酸钠要既能提取出成分,又要不破坏染色体。
6,细菌的动力试验是怎么做的
首先需要配置好半固体培养基(半固体培养基相对于固体培养基,琼脂含量少而显得稀薄,利于有动力的细菌生长扩散)。接种时,使用接种针挑取少许待检细菌,竖直做一个穿刺,但不要插到试管底部。培养后,如果动力为阳性,则可以看到穿刺线模糊,有明显的扩散生长痕迹。如果动力阴性,则穿刺线明显。首先需要配置好半固体培养基(半固体培养基相对于固体培养基,琼脂含量少而显得稀薄,利于有动力的细菌生长扩散)。接种时,使用接种针挑取少许待检细菌,竖直做一个穿刺,但不要插到试管底部。培养后,如果动力为阳性,则可以看到穿刺线模糊,有明显的扩散生长痕迹。如果动力阴性,则穿刺线明显。动力试验是结构试验的内容之一,借以观察和研究飞行器结构或构件的基本动力特性以及在各种环境下的动态稳定性和耐受能力,是验证飞行器动态性能和动力分析正确性的重要手段。动力试验的具体项目较多,主要的项目有动力特性试验、颤振试验、摆振试验、落震试验和振动冲击环境试验。如果只做动力,使用半固体琼脂即可,每个小试管2.5ml,高压灭菌冷却后即可使用。用接种针挑取所要检测的细菌,垂直从半固体琼脂表面插下去,插到离小试管底部只有5mm左右时再垂直抽回来,即做一条穿刺线,这样就完成了接种。放在37度培养箱中培养18-24小时可观察结果(部分细菌培养温度不同,由细菌的性质决定),如果穿刺线清晰,未扩散,则表明动力阴性。如果穿刺线模糊,侧光看可明显观察到穿刺线周围有扩散生长的痕迹,则为阳性。扩展资料:通常测定细菌动力的方法有显微镜法(悬滴法、压片法)和半固体琼脂试管法,但这些方法都是定性的,若将半固体琼脂试管法转为平板法,确定实验条件,可以准确定量测定细菌动力。动力实验使用的是半固体琼脂培养基。这种培养基因为含琼脂量比较少,使用待测菌进行穿刺接种之后进行培养,如果有动力,那么细菌就可以在这样的琼脂内进行穿行,从而造成穿刺线模糊,可以观察到细菌沿穿刺线周围扩散生长。参考资料来源:百度百科-动力试验做细菌的动力试验首先需要配置好半固体培养基(半固体培养基相对于固体培养基,琼脂含量少而显得稀薄,利于有动力的细菌生长扩散)。接种时,使用接种针挑取少许待检细菌,竖直做一个穿刺,但不要插到试管底部。培养后,如果动力为阳性,则可以看到穿刺线模糊,有明显的扩散生长痕迹。如果动力阴性,则穿刺线明显。
7,给药剂量临床常用量动物等效面积系数培养基内血清稀释度中培养
有限稀释法是一种常用的克隆方法。 将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数,计出1mL的细胞数。 用HT培养液稀释, 使细胞浓度为50~60个/mL,于96孔培养板中每孔加0.1mL(五六个细胞/孔)。接种2排,剩余细胞悬液用HT培养液作倍比稀释,再接种2排,如此类推,直至使每孔含0.5~1个细胞。培养7~10d后,选择单个克隆生长的阳性孔再一次进行克隆。一般需要如此重复3~5次,直至达100%阳性孔率时即可,以确保抗体由单个克隆所产生。例如: 实验细胞克隆化培养技术—有限稀释法一、实验目的: 1、掌握用有限稀释法进行细胞克隆化培养技术; 2、学会细胞克隆形成的辩观察技能; 3、配合抗体分泌细胞筛选技术,确定抗体分泌细胞。 二、实验原理: 克隆化培养即单细胞培养技术,用有限稀释法进行杂交瘤细胞克隆化培养,可以及时确定阳性杂交瘤细胞株,同时淘汰因发生染色体丢失或抗体的轻、重链基因分离而出现无抗体分泌阴性细胞株。 一般杂交瘤细胞需经过52—3次反复克隆后,才能达到100%细胞阳性率。 该办法亦适用于一般细胞培养中的细胞纯化、突变细胞株的选择,识别和分离。是细胞株的常用方法。 三、实验材料: 杂交瘤细胞、25毫升培养瓶、96孔细胞培养板(天津有机玻璃厂)、移液管(1毫升、5毫升、10毫升)、弯头滴管、倒置显微镜、CO2培养箱、白细胞计数板、计数器、盖玻片、防水笔、RPMI-1640、小牛血清、青链霉素、10毫升刻度离心管,00橡胶塞,饲养细胞(3-6×105/ml、见腹腔细胞的制备)。 四、实验步骤: 1、分装了每孔0.1毫升腹腔细胞的96孔细胞培养板(可提前24小时准备就绪,置CO2培养箱中备用); 2、自细胞培养瓶中收集长势良好的杂交瘤细胞(亦可自24孔培养板孔中收集),制成悬液。3、按白细胞计数方法准确计得细胞悬液的细胞数,一般在105/毫升左右。 4、取3支10毫升刻度离心管排列在超净工作台试管架上,先用无血清培养基将细胞稀释至103/毫升,再用含15%小牛血清的完全培养基稀释到101/毫升细胞,即每0.1毫升1个细胞。 5、每孔0.1毫升细胞悬液。 6、置37℃5%CO2培养箱,4天后取出观察,并在板盖上打上标记,做好记录并统计结果。 7、继续培养时,则在第4-5天更换1/2培养基,约第7-9天可以收获培养液上清用于检测抗体。并重复检测1-2次。 8、选择单克隆生长孔,生长良好,阳性强者,转移到24孔板再做克隆经培养或扩大培养。 五、实验结果: 实验结果以总细胞孔(如96孔)中出现克隆孔统计出克隆百分率,并可进一步按单细胞孔、双细胞孔、多细胞孔分别计算出百分率。 六、注意事项: 1、注意无菌操作,一旦发现污染(孔)必须及时处理; 2、计数细胞要求准确,稀释量亦要准确,否则将造成一孔多细胞克隆或克隆百分离太低; 3、在计数克隆出现率之前,不宜更换培养液,也不宜强烈振动培养板; 4、做克隆化培养的小牛血清必须是优质血清; 5、若做克隆抗体检测时,特别要保护细胞的生长状况,防止细胞生长不良甚至丢失。 七、说明: 哺乳动物细胞通过分离、稀释接种,培养在适宜于单细胞生长的培养液中,形成细胞克隆。运用这项技术可以制作细胞成活曲线,即在接种相同数量细胞的培养瓶中,加入不同浓度的化学药品,或照以不同剂量的射线,观察其对细胞的听见害程度。由此可以在哺乳类细胞中进行诱变试验及分离突变细胞。

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